Análises clínicasBiologia molecular

• (FCC 2018)

Considere o trecho abaixo retirado de um artigo científico.

As proteínas de T. gondii a serem usadas no IgG-WB foram quantificadas com o método de Lowry et al. e o gel de poliacrilamida 12% foi usado na separação eletroforética de proteínas com a transferência subsequente das proteínas para uma membrana de nitrocelulose. O papel de nitrocelulose foi manchado com Ponceau e, após lavagem com água destilada, as tiras de nitrocelulose foram cortadas e bloqueadas com leite desnatado a 5% mais Tween® salina tamponada com Tris (TBS). Posteriormente, lavou-se as tiras com TBS e leite desnatado a 5% e, então, adicionou-se o soro do paciente diluído em Tween TBS e leite desnatado a 5%, lavou-se e adicionou-se conjugado IgG anti-humano diluído em Tween TBS e leite desnatado a 5%. Após lavagens adicionais, o substrato cromogênico diaminobenzidina (DAB) a 0,2% e peróxido de hidrogênio (100 μL) foi adicionado. Quando as bandas foram visualizadas, a reação foi interrompida com água destilada. As amostras de controle positivo e negativo de anti-T. gondii foram incluídas em cada teste.